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大鼠Toll樣受體4(TLR4)ELISA試劑盒實驗使用說明書
發(fā)布時間:2025/4/27瀏覽:117次
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  以下是關(guān)于大鼠Toll樣受體4(TLR4)ELISA試劑盒的實驗使用說明綜合指南:

  BS-3097 大鼠Toll樣受體4(TLR4)ELISA試劑盒

  一、實驗原理

  采用雙抗體夾心法檢測TLR4水平:用純化的大鼠TLR4抗體包被微孔板,依次加入樣本、HRP標(biāo)記抗體形成復(fù)合物,TMB顯色后通過450nm波長測定OD值,顏色深度與TLR4濃度呈正相關(guān)。

  二、試劑盒組成

  核心組件?

  預(yù)包被96孔酶標(biāo)板

  凍干標(biāo)準(zhǔn)品(通常含2瓶,使用前需用稀釋液重構(gòu))

  生物素化抗體、HRP標(biāo)記親和素

  TMB顯色液及終止液

  輔助溶液?

  樣品稀釋液(20ml)

  濃縮洗滌液(需20-30倍稀釋)

  三、樣本處理

  血清/血漿?:采集后靜置10-20分鐘,2000-3000rpm離心20分鐘取上清。

  組織勻漿?:用預(yù)冷PBS勻漿后離心取上清。

  保存?:2-8℃短期保存,-20℃長期保存,避免反復(fù)凍融。

  四、操作步驟

  標(biāo)準(zhǔn)品配制?

  凍干標(biāo)準(zhǔn)品用稀釋液重構(gòu)后,梯度稀釋為40ng/ml至0.625ng/ml系列濃度。

  檢測流程?

  加樣:每孔加入100μl樣本或標(biāo)準(zhǔn)品,37℃孵育1-2小時。

  洗滌:甩干孔內(nèi)液體,用洗滌液洗板3-5次。

  顯色:加入TMB避光反應(yīng)15-30分鐘,終止后30分鐘內(nèi)讀板。

  五、注意事項

  質(zhì)量控制?:每次實驗需包含空白孔和標(biāo)準(zhǔn)曲線孔。

  干擾排除?:高濃度樣本需稀釋后復(fù)測,避免異嗜抗體干擾。

  有效期?:未開封試劑盒2-8℃保存6個月,開封后按說明書要求使用。

  六、適用范圍

  僅限科研使用,檢測范圍通常為0.625-40ng/ml,靈敏度約0.156ng/ml。

  (注:具體操作請以實際試劑盒說明書為準(zhǔn),不同品牌可能存在細(xì)微差異。)

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